Kouman ELISA Kits ap travay
Jun 05, 2019
Double antikò sandwich metòd 1. Pake: Avèk 0.05MPH9. se pake kabonat la tampon pou delye antikò a nan yon kontni pwoteyin nan 1 a 10 ?g/ml. Ajoute 0.1 ml, 4 degre C lannwit lan, nan twou reyaksyon chak plak polystyrène. Nan denmen, jete solisyon an nan twou a epi lave l 3 fwa ak tanpon lave pou 3 minit chak fwa.
(pou kout, lave, menm bagay la anba a). 2. Ajoute echantiyon: Ajoute yon sèten dilution nan echantiyon an yo dwe teste 0.1 ml nan pi wo a -mansyone twou reyaksyon pake a, enkube pou 1 èdtan nan 37 degre C. Lè sa a, lave.
(An menm tan fè twou vid, twou kontwòl negatif ak twou kontwòl pozitif). 3. Ajoute antikò ki make anzim-: Nan chak twou reyaksyon, ajoute yon anzim ki fèk dilye-antikò ki make (dilution apre titrasyon) 0.1 ml.
Enkube 0.5 a 1 èdtan nan 37 degre C epi lave.
4. Ajoute ekspozisyon koulè likid substrate: ajoute yon preparasyon tanporè nan solisyon substrate TMB 0.1 ml, 37 degre C 10 a 30 minit nan chak twou reyaksyon.
5. Fen reyaksyon: Ajoute 2M asid silfirik 0.05 ml nan chak twou reyaksyon . 6. Rezilta yo detèmine: yo ka sou yon background blan, dirèkteman ak je a toutouni yo obsève rezilta yo: pi fonse koulè a andedan twou reyaksyon an, pi fò degre pozitif la, reyaksyon negatif la se san koulè oswa trè fon, selon koulè a nan koulè a reflete.
Valè OD scanted: sou tèsteur ELISA a, nan 450nm (si yon rann koulè BTS, Lè sa a, 410nm), nan twou vid kontwòl zewo vale pou mezire valè OD chak twou, si pi gran pase valè OD kontwòl negatif espesifye nan 2.1 fwa, se sa ki pozitif.
Lwa endirèk
1. Sèvi ak pake a yo dwe tampon pou delye antijèn li te ye a nan 1 a 10 mg / ml, pou chak twou plis 0.1 ml, 4 degre C lannwit lan;
2. Lave 3 fwa nan demen;
3. Ajoute yon sèten dilution echantiyon an (antikò enkoni) 0.1 ml nan twou reyaksyon pake ki mansyone anwo a -, enkube pou 1 èdtan nan 37 degre C, lave;
4. (tou de vid, negatif ak pozitif kontwòl twou) nan twou reyaksyon an, ajoute yon etikèt anzim frèch dilye dezyèm antikò (anti-antikò) 0.1 ml;
5.37 degre C enkubasyon 35-60 minit, lave;
6.'Dènye fwa ou lave ak DDW. Etap ki rete yo se menm jan ak "metòd sandwich doub antikò" nan 4, 5, 6.